革兰氏染色液的制造 第1液：结晶紫溶液 结晶紫乙醇饱和溶液 100ml A液：结晶紫 2.5g 95%乙醇 25.0ml B液：1%草酸铵溶液 将结晶紫研细后，参加95%酒精，使之溶解，配成A液；将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成，。 第2液：（路）卢戈碘液 碘化钾 2g 碘 1g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾溶于少数蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶解时可稍加热，最终补足蒸馏水量。 第3液：脱色剂 （1）95%乙醇 或（2）丙酮乙醇溶液 100ml 95%乙醇 70ml 丙酮 30ml 第4液：番红花红染色液 2.5%番红O（Safranin O）95%酒精溶液 10ml 蒸馏水 90ml 革兰染色液的操作办法 1.涂片：取一洁净载玻片，滴一小滴生理盐水于玻片中心，按无菌操作要求，先用接种环，挑取少数某菌培育物于玻片中心水滴中，涂布均匀。要求涂片薄而无均匀。使其天然枯燥。 2.枯燥、固定：涂片枯燥后，快速经过火焰2-3次，做固定。固守时不行过热。以载玻片不棘手为宜。 3.染色： a) 初染：滴加结晶紫染色液掩盖玻片涂布区，染色1分钟，用水冲刷。 b) 媒染：滴加革兰氏碘液冲去残水，并掩盖1分钟，水洗。 c) 脱色：甩净载玻片上水分，歪斜玻片，并衬以白纸，用95%乙醇滴洗至无紫色褪下时停止，时刻20-30S。当即用水慢慢冲刷，留意脱色时刻不行过长，避免出现假阴性。 d) 复染：滴加番红染色液，染色3-5分钟，水洗。 待其天然枯燥，镜检。革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈赤色。 秋雨工作室 朱玺瑜 2011年10月28日

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