革兰氏染色法是细菌学中遍及的使用的一种辨别染色法，媒染剂碘液进入菌体后与结晶紫结合，革兰氏阳性菌对碘与结晶紫摄取量多且坚实，不易被酒精脱色。革兰氏阴性菌对碘与结晶紫摄取量少，不坚实，易被酒精脱色。为观察便当，脱色后再用一种赤色染料如碱性蕃红发展复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌那么被染上赤色。

  〔2〕.无菌部位的标本，如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等，应取适量标本〔最高可达5-7ml〕,经3000rpm离心10min.，取沉渣涂片染色。

  2、涂片制造：菌液涂片时，用接种环沾取菌液点在载玻片上，标本可爽性在玻片上涂布；菌落涂片时，先取生理盐水一滴，置玻片上，用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制造的涂片应天然单调，并经火焰固定，固定的温度不宜过高，以玻片不和触摸手背不烫为准，否那么可能使细菌形状改变。将固定后的涂片发展染色。

  革兰氏染色的重点是严厉驾御酒精脱色程度，如脱色过度，那么阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不行时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色成果，如阳性菌造就时刻过长，或已逝世及部分菌自行溶解了，都可能会呈阴性反应。

  〔3〕.加上95%酒精,摇摆玻片,根据涂片厚度,脱色约30-60秒，水洗,吸去水分。